BRADFORD 500 ML
ID: 1637ENTREGA IMEDIATA
R$ 406,00
Detalhes do Produto
Reagente Bradford Scienco-Biotech – Quantificação de
proteínas
Descrição do produto
O reagente Bradford da Scienco Biotech é ideal para determinação da concentração de
proteínas de maneira simples e precisa em uma solução. O procedimento é baseado
na formação de um complexo entre o corante Azul de Comassie e moléculas
proteicas presentes no ensaio. Encontra-se pronto para uso, não sendo
necessária nenhuma preparação ou diluição adicional. O tempo de incubação com o
reagente é rápido, apenas 5 minutos e a amostra pode ser mensurada a 595 nm em
espectrofotômetros. A quantificação com Reagente Bradford Scienco Biotech pode
ser desenvolvida em ensaios de quantificação realizados em cuvetas ou
escalonados a microplacas. A quantidade de absorção é proporcional a quantidade
de proteínas
presentes. O intervalo linear deste ensaio utilizando BSA (bovine serum albumin)
como proteína padrão é 125-1000 μg/ml de proteína para ensaios padrão e 1.25–10 µg/ml para microensaios.
Características do Produto
A presença de açúcares ou outras substâncias
redutoras junto com tióis não interferem com este reagente. Açúcares redutores
são frequentemente utilizados para estabilizar as proteínas em solução. Outros
métodos tradicionais sofrem interferência da presença destes compostos (BCA e
Lowry). No entanto, o reagente Bradford da Scienco Biotech é compatível com
baixas concentrações de detergente. Rotineiramente ensaios para quantificação
de proteínas com emprego do reagente Bradford, são realizados em temperatura ambiente.
O desenvolvimento da cor ocorre imediatamente. A absorbância da proteína é
mensurada a 595nm, registrada e sua concentração é determinada em comparação
com uma curva-padrão. Microensaios são aplicados para soluções em baixas
concentrações de proteínas.
Precauções
e Isenção
Este produto é apenas para uso em pesquisa. Não deve
ser aplicado para fins diagnósticos, domésticos, farmacêuticos ou em outras áreas.
Por favor, consulte a Ficha Técnica de Segurança para informações sobre perigos
e práticas seguras de manipulação de químicos.
Armazenamento
e Estabilidade
Condição de transporte: gelo gel
Após o recebimento do reagente Bradford Scienco-Biotech recomenda-se seu armazenamento imediato a 4 - 8°C. O produto possui estabilidade de no mínimo 12 meses a 4°C.
Procedimento de uso
Para
ensaio padrão: Realize diluições com proteínas padrão, normalmente BSA.
Concentrações dos respectivos padrões que devem ser preparados com BSA: 0, 250, 500, 750 e 1500 μg/mL. Remova o reagente do estoque a 4°C e equilibre sua temperatura em
temperatura ambiente (25°C). Homogenize o reagente antes do uso. Após
preparação dos tubos com as concentrações de BSA conhecidas e corretamente
identificadas (0, 250, 500, 750 e 1500 μg/mL), adicione 10 μL de cada uma das soluções acima
a um novo tubo respectivo. Adicione 0,5 mL de Bradford a cada tubo e misture
por inversão. Incube a solução em temperatura ambiente por pelo menos 5 minutos
e tempo máximo de 1 hora. Mensure a absorbância em espectrofotômetro a 595nm.
Para microassay: O intervalo linear destes
ensaios para BSA é 1.25–10 µg/ml. 1. Remova
o reagente do estoque a 4 ° C deixe equilibrar até chegar em temperatura
ambiente (25°C). Homogenize o reagente algumas vezes antes do uso. Prepare tubos com concentrações conhecidas de BSA: 0, 2.5, 5 , 7.5 e 10 μg / mL. Transfira 0,5 mL de cada uma dessas soluções acima a, um novo tubo corretamente identificado. Após
a transferência, aplique 0,5mL do reagente Bradfor Scienco-Biotech e misture
por inversão. Incube a solução em
temperatura ambiente por pelo menos 5 minutos e tempo máximo de 1 hora. Mensure
a absorbância em espectrofotômetro a 595nm.
Rendimento
O reagente Bradford da Scienco Biotech possui frascos de 250 mL e 500 mL ou volumes que
podem ser customizados conforme as necessidades de sua aplicação. Para volumes
de 2,5 mL utilizados na metodologia padrão de detecção, frascos de 500 mL
possuem rendimento para execução de pelo menos 160 ensaios.
Referência
Bradford,
MM. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities
of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical Biochemistry, 72:248-54, 1976.
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