Sequenciamento



A ACTGene Análises Moleculares realiza sequenciamentos de DNA a partir de produtos de PCR e plasmídeos utilizando o equipamento ABI-Prism 3500 Genetic Analyzer (Applied Biosystems). O tamanho das sequências obtidas normalmente é de 700 nucleotídeos, podendo chegar a 1.200 nucleotídeos dependendo da qualidade e quantidade dos DNA-moldes e primers fornecidos.

Salientamos que o usuário é responsável pela qualidade e pela quantidade do DNA-molde e primer a serem fornecidos. Por outro lado, a ACTGene tem o compromisso de trabalhar para que cada amostra submetida para sequenciamento produza uma sequência de alta qualidade e o mais longa possível.

 

Valores do serviço de sequenciamento de DNA:

Tipo de amostra

Valor unitário

Amostra já marcada com o reagente BigDye (Applied Biosystems)

R$ 15,00

Amostra não marcada com o reagente BigDye (Applied Biosystems)

R$ 22,00

 

Redução de custos do sequenciamento:

O envio de grandes quantidades de amostras não marcadas terão redução nos valores de sequenciamento, conforme tabela abaixo:

 

Quantidade de amostras

Valor unitário

De 1 a 191

R$ 22,00

De 192 a 383

R$ 21,45

De 384 a 767

R$ 20,90

Mais de 768

R$ 19,80

 

Adição de primer universal:

Para pesquisadores que não possuem primers universais, é possível enviar somente o DNA-molde. Nós faremos a adição do primer universal solicitado. Dispomos dos primers universais listados abaixo. O valor de sequenciamento com o serviço de adição de primer será de R$ 28,00 por amostra.

 

Primer Universal

Sequência (5'-3´)

T7 Promoter

AAT ACG ACT CAC TAT AGG

T7 Terminator

GCT AGT TAT TGC TCA GCG G

T3

ATT AAC CCT CAC TAA AGG

SP6

GAT TTA GGT GAC ACT ATA G

M13 (-21) Forward

TGT AAA ACG ACG GCC AGT

M13 (-40) Forward

GTT TTC CCA GTC ACG AC

M13 Reverse

CAG GAA ACA GCT ATG ACC


Normas para o encaminhamento de amostras não marcadas:

Amostra/Quantidade

Quantidade de DNA-molde (ng)

Quantidade de primer (pmol)

Produto de PCR

30 a 60

4,5

Plasmídeo

100 a 250

4,5

 

Em um tubo de microcentrífuga, coloque o DNA-molde na quantidade solicitada, um único primer e complete o volume final de 6 µl com água ultrapura (Mili-Q).

 

As amostras de DNA-molde e primer podem ser secas em speed-vac ou, alternativamente, deixando-se o tubo aberto em estufa a 60 °C. Envie as amostras a nós pelos correios normal ou Sedex, à temperatura ambiente. Iremos ressuspender as amostras em 6 µl de água ultrapura e proceder a marcação e sequenciamento. Caso as amostras sejam enviadas líquidas, recomendamos que as acondicione em placas de gelo gel para evitar degradação do material.

 

Alternativamente, poderemos ceder microplacas ópticas de 96 poços para quantidades superiores a 50 amostras. Neste caso, prepara-as conforme indicado na tabela abaixo:

Amostra/Quantidade

Quantidade de DNA-molde (ng)

Quantidade de primer (pmol)

Produto de PCR

15 a 30

2,5

Plasmídeo

50 a 125

2,5

 

Em cada poço da microplaca, coloque o DNA-molde na quantidade solicitada, um único primer e complete o volume final de 3 µl com água ultrapura (Mili-Q).



Caso seja a sua primeira experiência com a ACTGene, poderemos realizar um teste GRATUITO com duas (2) amostras/leituras antes de sequenciarmos um número maior.


Em condições normais, o prazo para encaminhamento dos resultados (por e-mail) é de até 15 dias.


Endereço para envio das amostras e formulário por correio (preferencialmente SEDEX):

ACTGene Análises Moleculares

Rua Gustavo Valente, 69

Bairro Bela Vista

CEP 94810-250 - Alvorada/RS

 

Endereço e horário para entrega das amostras e formulário pessoalmente:

Campus do Vale da UFRGS, Centro de Biotecnologia (Prédio 43.421) – Andar Inferior – Secretaria.

Horário para entrega de amostras: segunda a sexta, das 08:30 às 12 h e das 13 h às 17 h.


Contatos:

Jordana Ludwig

Fones: (51) 3044-3307/3483-3335/98426-1089

e-mail: actgene@ludwigbiotec.com.br

 

Thais Lopes

Fone: (51) 3308-9410/99346.8841

e-mail: actgene@ludwigbiotec.com.br

 

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Os serviços de sequenciamento e seus resultados deverão ser destinados exclusivamente à pesquisa. Qualquer uso dos mesmos para outros fins é de inteira responsabilidade do cliente solicitante. A ACTGene Análises Moleculares Ltda. ou quaisquer de seus técnicos não se responsabilizam pelo uso dos resultados do serviço de sequenciamento para quaisquer fins que não a pesquisa.

Formulário para envio de amostras:

Baixe o Formulário em PDF ou preencha o Formulário Online.


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